初二（4）班  王玺  剧慧静  李凌光
指导教师：苏丽丽 张华 唐占兴

一、选题目的：
2000年10月12日，我们花卉科研小组的同学在石家庄市花卉园参观时看到了一种名叫“彩色马蹄莲”的花卉，其艳丽的花色令我们惊诧万分。从河北师大生物系了解到：彩色马蹄莲（Zantedeschia aethiopica）属天南星科，马蹄莲属植物，其花型为肉穗型花序，包于红黄粉红桔红橙黄或红黄色佛焰苞内，多数彩色马蹄莲的绿叶带月白色斑点或条纹，可作为有较好观赏价值的配叶材料，由于花叶皆佳，在国内外市场流行，是名贵的观赏花卉和切花,具有较高的观赏价值和经济价值。但传统的彩色马蹄莲分割块茎繁殖法，繁殖速度较慢、繁殖系数较低。我想能不能利用生物课上学习的细胞的全能性原理，高效、快速繁殖这种名贵花卉，使它更好的为人们服务，在老师和河北师范大学生物系沈教授的帮助下，从花卉园买回由北京引进的４个彩色马蹄莲品种开展了组织培养研究实验。
二、实施过程：
１．配置培养基：
原料：
以MS为基本培养基：
糖：３％
琼脂：０.7％
添加剂(mg/L)诱导培养基：BA2+NAA0.1和BA1+NAA0.1
增殖培养基：BA0.5+NAA0.5 和BA0.2+NAA0.2                     
生根培养基：IAA0.2+NAA0.3　NAA0.5和NAA0.1
        步骤：
用蒸馏水固定　　加热到1000C至琼脂完全溶解　　用NaOH调节PH值至5.8　　分装（20毫升／瓶）　　高压蒸汽灭菌1210C 20分钟　　　培养基放置２－３天，若无污染，即可使用。
（在外温度260C左右，每天光照10－12小时下培养。）
２．选取外殖体：
将彩色马蹄莲块茎刷洗干净，刮去芽表褐色皮层，挖取0.5cm2左右的生长芽或芽眼放入洗衣粉水中充分漂洗，然后在0.1%的HgCl2中浸泡消毒15－20分钟，切取四周少许组织放入2%的次氯酸钠溶液中消毒15－20分钟，转入１%的次氯酸钠溶液中消毒15－20分钟，无菌水中漂洗三次，除去残留消毒液，接种在诱导培养基中。
三、结果与分析：
1 外殖体灭菌的最佳方法：
　            表1：芽眼在不同灭菌时间的萌发率和成芽率   
 
芽眼总数 
萌发个数 
成芽个数 
污染个数 
萌发率 
成芽率 
污染率 
15分 
36 
6 
14 
15 
16.7% 
38.9% 
41.7% 
18分 
36 
8 
16 
11 
22.2% 
44.5% 
30.6% 
20分 
36 
10 
17 
9 
27.8% 
47.2% 
25%
芽眼在各种消毒液中分别灭菌15、18、20分钟表明，灭菌时间短，污染严重，萌芽率和成芽率低，随着灭菌时间的增加，污染减少，但死芽增多，以18—20分钟的效果较好，成芽率可达45%-47%，污染率较高，可能是由于材料来自于土，其体内微生物含量高所引起。
2芽眼的诱导与增殖：
将接种于BA1+NAA0.1培养基上的部分单芽切去叶片为对照，部分分切成两半，分别接种于诱导培养基BA２+NAA0.1和BA1+NAA0.1。诱导培养表明（表2）培养基BA２+NAA0.1较BA1+NAA0.1产生的丛芽多，说明高浓度的BA较低浓度的BA易诱导丛芽及愈伤组织产生，单芽对半切较不切的更易诱导出从芽及愈伤组织。继续培养60天后，大部分芽块基部形成致密具绿色芽点的愈伤组织块，并有大量不定小芽长出，较大的不定芽高达2厘，在诱导培养基BA1+NAA0.1中形成的不定芽有根的分化，诱导培养基BA２+NAA0.1则无。芽眼萌发的原生芽与愈伤组织分化的不定芽植株无明显差异。 
BA浓度对单芽的诱导   
处理 
培养基 
芽块数 
30天分化从芽数 
60天分化从芽数 
单芽切半 
BA２+NAA0.1 
20 
10 
20 
单芽不切 
BA２+NAA0.1 
20 
3 
16 
单芽切半 
BA1+NAA0.1 
20 
3 
16 
单芽不切 
BA1+NAA0.1 
20 
1 
10

3激素浓度对马蹄莲增殖的影响
诱导的从芽和带绿色芽点的愈伤组织块在诱导培养积极增殖培养基，继代增殖表明（表２）在